Vamos falar de mais dois parâmetros da validação analítica, de acordo com a RE 899, a robustez e linearidade.
Robustez
A robustez de um método analítico é a medida de sua capacidade em resistir a pequenas e deliberadas variações dos parâmetros analíticos. Indica sua confiança durante o uso normal.
Caso haja susceptibilidade do método à variações nas condições analíticas, estas deverão ser controladas e precauções devem ser incluídas no procedimento.
Fatores que devem ser considerados na determinação da robustez do método analítico:
| Preparo das Amostras |
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| Espectrofotometria |
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| Cromatografia Líquida |
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| Cromatografia Gasosa |
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Avaliação da Robustez
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- A verificação da robustez deve ser realizada após a validação do método;
- Planejamento experimental para avaliar a robustez pelo método de Youden – matriz de experimento;
- Avaliar qual o impacto das variações – teor (exatidão)
Linearidade
É a capacidade de uma metodologia analítica demonstrar que os resultados obtidos são diretamente proporcionais à concentração do analito na amostra, dentro de um intervalo especificado.
Recomenda-se que a linearidade seja determinada pela análise de, no mínimo, 5 concentrações diferentes.
Estas concentrações devem seguir os intervalos da tabela a seguir:
| Ensaio | Alcance |
| Determinação quantitativa do analito em matérias-primas ou em formas farmacêuticas | De 80% a 120% da concentração teórica do teste. |
| Determinação de impurezas | Do nível de impureza esperado até 120% do limite máximo especificado. Quando apresentarem importância toxicológica ou efeitos farmacológicos inesperados, os limites de quantificação e detecção devem ser adequados às quantidades de impurezas a serem controladas. |
| Uniformidade de conteúdo | De 70% a 130% da concentração teórica do teste. |
| Ensaio de dissolução | De ± 20% sobre o valor especificado para o intervalo. Caso a especificação para a dissolução envolva mais de um tempo, o alcance do método deve incluir –20% sobre o menor valor e +20% sobre o maior valor. |
Plano Experimental
Preparar uma solução mãe da substância química de referência e a partir desta, diluições a fim de obtermos soluções em cinco níveis de concentração.
Por exemplo: 50 %, 75 %, 100 %, 125 % e 150 %, do valor rotulado.
Cálculos Estatísticos
Calcular a Média, Variância o DP e o DPR . Prosseguir com os seguintes cálculos.
- Elaborar Curva de Calibração
- Calcular coeficiente angular (b)
- Calcular coeficiente linear (a)
- Cálculo do coeficiente de correlação linear (r)
- Cálculo do erro padrão da estimativa (desvio padrão residual), (Se )
- Cálculo da soma dos quadrados dos resíduos (SSE)
Agora que você já viu um pouquinho a respeito dos parâmetros de uma validação, entre em contato conosco e traga suas análises para nosso laboratório.
Fonte: http://www.crq4.org.br/informativomat_270 BRASIL, Resolução (RE) nº 899, de 29 de maio de 2003. Determina a publicação do "Guia para validação de métodos analíticos e bioanalíticos". Diário Oficial [da] Republica Federativa do Brasil, Brasília, DF, 02 de junho de 2003.
